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湖北原位杂交技术免费咨询「多图」安家太表姑奶奶
2024-01-18 02:44  浏览:25
6分钟前 湖北原位杂交技术免费咨询「多图」[贝科新肽a5f8c59]内容:原位杂交法是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行定量定位的方法。原位杂交法可以在细胞标本或组织标本上进行。另有荧光原位杂交使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。

在ISHH,整个实验周期是比较长的,实验程序也比较繁杂,而杂交在ISHH整个实验中可被认为是“短兵相接”的一步。杂交前的一切准备工作如增加组织通透性都是为了在杂交这一步骤中核酸探针能进入细胞或组织与其内的靶核苷酸相结合。因此,杂交是ISHH中关键的而且是重要的一个环节。杂交是将杂交液滴于切片组织上,加盖硅化的盖玻片,防止孵育过程中的高温(50℃左右)导致杂交液的蒸发。为保证杂交所需的湿润环境,可将其放在盛有少量5×SSC或2×SSC(standard saline citrate, SSC)溶液的硬塑料盒中进行孵育。杂交液的成分和预杂交液基本相同,所不同的是加入了标记的核酸探针和硫酸葡聚糖。

荧光原位杂交(FISH)技术具有以下优点:

高特异性:荧光探针的合成是定向的,保证了杂交过程的特异性,可以有效地降低非特异性杂交和背景干扰。

高灵敏度:荧光信号的检测比性信号的检测更灵敏,可以检测出低拷贝数的DNA序列,甚至可以检测单个基因序列。

快速简便:FISH技术操作简便,杂交过程可以在数小时或数天内完成,而且不需要过于复杂的设备,便于在实验室开展。

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